多肽合成方式，多肽合成办法及难题处理

杭州固拓生物

多肽合成办法是把不同的或相同的多个氨基酸按指定次第连结起来构成肽链(含多个肽键-CONH-)化合物的合成办法。

停止多肽合成，必需首先处理两个问题：

1.要将氨基酸两个官能团中的一个(通常选氨基)封锁，即用维护基团维护起来，只让没被维护的那个基团(羧基)去同另一个氨基酸分子反响。采用的维护基团不只要易于同被维护基团发作反响，还须在肽键构成后易去除。
2.要活化没被封锁的官能团，使之能在较温和的条件下发作反响。可作为氨基维护试剂的有氯甲酸苄酯和叔丁氧甲酰氯等，用来活化羧基的办法则是将羧基变成酰氯、酯、混合酸酐等衍生物或加缩合剂(失水剂)二环已基碳酰二亚胺，使氨基和羧基分离起来。

1962年梅瑞费尔德(R.Merrifield)引入了一个新的多肽合成办法——固相多肽合成法。其原理是让第一个氨基酸附在一种不溶性高聚物分子上，然后再逐一同别的氨基酸连结，增长的肽链连结在不溶性高聚物上，这样可大大地减少每次别离操作的损失，简化提纯手续，省去纯化个别中间体的费事。并能使加料处置机械化和自动化，缩短了多肽合成周期。当完成多肽衔接后，用复原性断裂法把多肽同高聚物别离，再用色层法提纯。固相法的树立和应用大大地促进了多肽合成研讨。

多肽合成办法分类

多肽的合成主要分为两条途径:化学合成多肽和生物合成多肽。

化学合成主要是以氨基酸与氨基酸之间缩合的方式来停止。在合成含有特定次第的多肽时，由于多肽合成原料中含有官能度大于2的氨基酸单体，多肽合成时应将不需求反响的基团暂时维护起来，方可停止成肽反响，这样保证了多肽合成目的产物的定向性。多肽的化学合成又分为液相合成和固相合成。

多肽液相合成主要分为逐渐合成和片段组合两种战略。逐渐合成简约疾速，可用于各种生物活性多肽片段的合成。片段组合法主要包括自然化学衔接和施陶丁格衔接。近年，多肽液相片段合成法开展疾速，在多肽和蛋白质合成范畴已获得了严重打破。在多肽片段合成法中，依据多肽片段的化学特定性或化学选择性，多肽片段可以自发停止衔接，得到目的多肽。由于多肽片段含有的氨基酸残基相对较少，所以纯度较高，且易于纯化。

1963年，美国著名生物化学家Merrifield提出了固相合成法，展开了多肽固相合成，行将氨基酸的C末端(羧基端)衔接在不溶树脂上，然后在此树脂上依次停止氨基酸的缩合、延长肽链。固相合成办法可分为叔丁氧羰基(Boc)办法和9-芴甲基氧羰基(Fmoc)办法。人们以多肽的液相和固相合成办法为根底又开展了氨基酸的羧内酸酐(NCA)法、组合化学法等。
多肽的生物合成办法主要包括发酵法、酶解法，随着生物工程技术的开展，以DNA重组技术为主导的基因工程法也被应用于多肽的合成。

本文摘自杭州固拓多肽生物科技有限公司（www.gotopbio.comwww.gotopbio.com）